Иммуноблот (вестерн-блот, Western blot) — высокоспецифичный лабораторный метод, позволяющий выявить антитела к конкретным белкам-антигенам. Чаще всего его используют как подтверждающий тест — после положительного скринингового результата (например, ИФА на ВИЧ).
ℹ️ Информационная справка. Эта статья объясняет принцип метода. Назначить иммуноблот и интерпретировать результат может только врач.
Что такое иммуноблот
Иммуноблот — метод выявления специфических антител с помощью разделённых белков возбудителя (или аутоантигенов), нанесённых на нитроцеллюлозную полоску (мембрану). Метод разработан в 1979 году и отличается высокой специфичностью: он показывает, к каким именно белкам у пациента есть иммунный ответ.
Термин «вестерн-блот» происходит от лабораторного юмора: метод создан по аналогии с «Саузерн-блотом» (Southern blot), названным в честь его изобретателя Эдвина Саузерна; «вестерн» — это запад, т. е. шутливое дополнение.
Как работает метод
- Получение антигенов — белки возбудителя (например, оболочечные и ядерные белки ВИЧ) разделяют по размеру с помощью электрофореза в геле.
- Перенос на мембрану — разделённые белки «переводят» (блоттингом) на нитроцеллюлозную полоску, где они фиксируются.
- Инкубация с сывороткой пациента — если у пациента есть антитела к этим белкам, они связываются с соответствующими полосами на мембране.
- Детекция — добавляется фермент-конъюгат с субстратом: там, где связались антитела, появляются тёмные полосы.
- Интерпретация — наличие и расположение полос сравнивается с контрольным образцом; каждая полоса соответствует конкретному белку возбудителя.
Когда применяют иммуноблот
- ВИЧ-инфекция — подтверждение положительного ИФА (скрининга); результат иммуноблота необходим для постановки диагноза.
- Гепатиты — уточнение специфичности антител к вирусу гепатита C.
- Аутоиммунные заболевания — определение антинуклеарных антител, антител к кардиолипину и другим аутоантигенам.
- Боррелиоз (болезнь Лайма) — двухэтапная серодиагностика.
- Паразитарные инфекции — трихинеллёз, токсокароз и др.
Что показывает результат
Результат описывается как наличие или отсутствие специфических полос. Лаборатория указывает, к каким белкам обнаружены антитела; интерпретационные критерии (сколько полос и каких — для «положительного» вывода) различаются для разных инфекций и регламентированы стандартами.
Отсутствие полос при положительном скрининге не всегда означает ложноположительный скрининг — врач оценивает весь комплекс данных.
Получите расшифровку результата иммуноблота у врача-инфекциониста или иммунолога.
Частые вопросы
Почему врач назначил иммуноблот после ИФА? ИФА используется как скрининг — он чувствителен, но может давать ложноположительные результаты. Иммуноблот высокоспецифичен: он подтверждает или опровергает скрининговый результат, определяя, к каким именно белкам есть антитела.
Иммуноблот и иммунохроматография — одно и то же? Нет. Иммунохроматография (экспресс-тесты) — другой метод, основанный на движении жидкости по полоске. Иммуноблот сложнее, требует лабораторного оборудования и применяется как подтверждающий тест, а не экспресс-диагностика.
Об авторе
Материал подготовлен редакцией analiz-razbor.ru — медицинского информационного портала о лабораторной диагностике. Мы не ставим диагнозы и не заменяем консультацию специалиста.
Дисклеймер
Статья носит исключительно образовательный характер. Не является медицинской консультацией и не заменяет обращение к врачу. Для интерпретации результатов анализов обратитесь к специалисту.
Источники
- CDC — «Laboratory Testing for the Diagnosis of HIV Infection», 2014
- Клинические рекомендации МЗ РФ по диагностике ВИЧ-инфекции
- Towbin H. et al. «Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels» — PNAS, 1979